KASP基因分型介紹
KASP(Kompetitive Allele-Specific PCR),即競(jìng)爭(zhēng)性等位基因特異性PCR,原理上與TaqMan檢測(cè)法類似,都是基于終端熒光信號(hào)的讀取判斷,每孔反應(yīng)都是采用雙色熒光檢測(cè)一個(gè)SNP位點(diǎn)的兩種基因型,不同的SNP對(duì)應(yīng)著不同的熒光信號(hào)。
KASP技術(shù)與TaqMan法類似,它與TaqMan技術(shù)不同的是,它不需要每個(gè)SNP位點(diǎn)都合成特異的熒光引物,它基于*的ARM PCR原理,所有的位點(diǎn)檢測(cè)終都可以使用通用熒光引物進(jìn)行擴(kuò)增,這降低了KASP技術(shù)的試劑成本,既有準(zhǔn)確度,又降低了成本,更具SNP位點(diǎn)適用性,因此在醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)檢測(cè)方面KASP技術(shù)都有很好的應(yīng)用潛力,如癌癥、代謝疾病、心血管疾病、糖尿病、動(dòng)植物育種、水產(chǎn)養(yǎng)殖等研究。
技術(shù)原理
KASP反應(yīng)包括Primer Mix和Master Mix兩種主要成分。Primer Mix由兩條末端堿基不同的等位基因正向引物與一條反向引物構(gòu)成,兩條正向引物5’端分別連有不同序列的檢測(cè)引物序列。Master Mix包含兩條帶有不同熒光的檢測(cè)引物。
1、變性模板與Primer Mix中相匹配的引物結(jié)合并退火,延伸后序列被加上了檢測(cè)引物的序列。
2、等位基因特異性的末端序列的互補(bǔ)鏈合成。
3、帶有不同熒光的兩條檢測(cè)引物與互補(bǔ)鏈結(jié)合,特異序列對(duì)應(yīng)的檢測(cè)引物隨PCR反應(yīng)指數(shù)性擴(kuò)增,相應(yīng)熒光信號(hào)被檢測(cè)。
4、數(shù)據(jù)分析。
實(shí)驗(yàn)過程:
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
KASP技術(shù)優(yōu)勢(shì)
1、只需要合成兩條通用熒光探針,節(jié)省了探針的合成費(fèi)用。
2、支持低、中、高通量研究,以及單個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
3、對(duì)PCR儀和熒光定量?jī)x等儀器設(shè)備具有良好的兼容性。
我們的優(yōu)勢(shì)
1、提供各種實(shí)驗(yàn)材料和儀器,滿足項(xiàng)目課題實(shí)驗(yàn)需要。
2、專業(yè)的操作人員。
3、高規(guī)格實(shí)驗(yàn)室。
4、數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快。
5、完善的服務(wù)體系,全程跟進(jìn),確保滿意。
服務(wù)流程
1、提交項(xiàng)目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)討論項(xiàng)目細(xì)節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對(duì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿意并達(dá)成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開展實(shí)驗(yàn),按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。
6、結(jié)題,提供實(shí)驗(yàn)原始結(jié)果和分析結(jié)果、實(shí)驗(yàn)流程、實(shí)驗(yàn)條件等等。
咨詢與訂購(gòu)
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